طريقة علمية لقياس كمية NMN في العينات البيولوجية
1. مقدمة
مكملاتالنيكوتيناميد أحادي النوكليوتيد (NMN)لتنظيم مستوى النيكوتيناميد ، تم الكشف عن الأدينين ثنائي النوكليوتيد (NAD +) ليكون تدخلا واعدا لمكافحة الشيخوخة. ومع ذلك ، لا يزال من الصعب تحديد الكمية الدقيقة لوسيطات NAD + ،NMNعلى وجه الخصوص. هذه الدراسة مدعومة بتقديم طريقة جديدة ، منهجية LC-MS / MS بوساطة النظائر المزدوجة (dimeLC-MS / MS) ، للقياس الكمي الدقيق لNMNفي العينات البيولوجية.
2. العوامل المؤثرة على الكشف الدقيق عن NMN
يصعب اكتشاف NMN بدقة بسبب تعرضها للتدهور الأنزيمي ، والتحويل في معالجة العينات ، وسلوكياتها المعقدة في ظروف العمود والاستخراج المختلفة ، بالإضافة إلى تأثير المصفوفة.
على وجه التحديد ، تتميز NMN بخصائص القطبية العالية والتقلب المنخفض ، والتي يسهل إذابتها في الماء ولكن يصعب إذابتها في المذيبات العضوية. هذه الخصائص تقيد بشكل كبير تطبيق العديد من طرق التحليل الكمي التقليدية.
Bعينات علميةمثليحمل الدم أنشطة كبيرة من CD38 و CD73 (ecto-5’-nucleotidase) ، وكلاهما يمكن أن يستخدم NMN كركيزة.
سلوك NMN في العمود معقد للغاية ، ربما بسبب الطبيعة الثنائية لشحناته بحيث تؤثر الاختلافات الدقيقة في ظروف الاستخراج والعمود بشكل كبير على الكشف الموثوق والدقيق ل NMN.
3. استراتيجيات التأقلمدايمLC-MS / MSلتقليل تأثير عوامل التأثير
ولتفادي تداخل العوامل المذكورة أعلاه، يطبق عمود نموذج أولي NMN-2. يحتوي هذا العمود على جزيئات السيليكا عالية النقاء القائمة على C18 والتي تكون أكثر قدرة على ربط المركبات المحبة للماء من جزيئات الكربون ، مما يحسن القدرة على الفصل.
يستخدم حمض البيركلوريك (PCA) لأنه يمكنه استخراج NAD + و NMN بكفاءة من العينات البيولوجية مثل البلازما بأقل قدر من الخسائر.
لضبط تأثيرات المصفوفة ، تتم إضافة كمية ثابتة (1 ميكرومتر) من كل مركب نظائر إلى العينات البيولوجية قبل استخراج PCA.
4. الميزةsمن دايميلLC-MS / MS
يمكن لمعايير NMN النظيرية المزدوجة ، NMN (M + 14) و NMN (M + 5) ، في المنهجية التي تعتمد على LC-MS / MS تتبع مصير NMN بدقة أثناء معالجة العينات ، مما يزيد بشكل كبير من دقة وموثوقية قياس NMN في العينات البيولوجية. إلى جانب ذلك ، يمكن ل dimeLC-MS / MS تقييم كفاءة الاستخراج والتركيزات المطلقة ل NMN في أنواع مختلفة من العينات البيولوجية.
5. الخاتمة
الهلLC-MS / MS جديد-يمكن للمنهجية المدفوعة بمعايير NMN النظيرية المزدوجة قياس NMN بدقة وموثوقية في العينات البيولوجية.يمكن استخدامه للدراسات المستقبلية حول تناول NMN.
6. المرجع
Unno، Junya et al. "التقدير الكمي المطلق لأحادي النوكليوتيد النيكوتيناميد في العينات البيولوجية عن طريق قياس الطيف الكتلي الترادفي الثنائي بوساطة النظائر السائلة (dimeLC-MS / MS)." npj الشيخوخة المجلد 10،1 2. 2 يناير 2024 ، doi: 10.1038 / s41514-023-00133-1
لماذا تختاربونتاك?
بونتاكهو زعيم العالمNMNصناعة. لدينا أول تقنية تحفيز إنزيم كامل في الصين ، وأصبحنا المؤسسة الرائدة في منتجات الإنزيم المساعد التي تستخدم على نطاق واسع في الصناعة الصحية ، والطب والجمال ، والزراعة الخضراء ، والطب الحيوي وغيرها من المجالات. والجدير بالذكر أن BONTAC هو NMNمورد المواد الخام لفريق ديفيد سنكلير الشهير في جامعة هارفارد. خدماتنا ومنتجاتنا جديرة بالثقة. علاوة على ذلكبونتاكلديها مركز أبحاث مستقل لتكنولوجيا هندسة الإنزيم المساعد على مستوى المقاطعات في الصين والمصانع المملوكة ذاتيا ، حيث يمكن ضمان نقاء واستقرار المنتجات.
اخلاء المسؤوليه
الهلالمقالة هيبناء على المرجع فيمجلة أكاديمية. المعلومات ذات الصلة هيزودلأغراض المشاركة والتعلم فقط، ولا تمثل أي أغراض للمشورة الطبية. إذا كان هناك أي انتهاك ، من فضلكالاتصالالمؤلفمن أجلحذفأيون. الآراء المعبر عنها في هذه المقالة لا تمثل موقفبونتاك.