Nepaprasti itin jautraus ELISA privalumai su tio-NAD ciklu nustatant dengės NS1 baltymą

1. Įvadas

Dengės karštligė yra ūminė infekcinė liga, kurią sukelia Dengės karštligės virusasper užkrėstos Aedes rūšies (Ae. aegypti arba Ae. albopictus) uodų įkandimą, su pagrindiniais simptomais, tokiais kaip didelis karščiavimas, galvos svaigimas, galvos skausmas, bėrimas ir Stiprusskausmai (akių, raumenų, sąnarių ar kaulų skausmas) ir kt. Ši liga yra plačiai paplitusi atogrąžų ir subtropikų klimatuose. Apskaičiuota, kad kasmet užsikrečia nuo 100 iki 400 milijonų žmonių, kur daugiau kaip 80% paprastai būna lengvi ir besimptomiai. Nepaisant to, sunki dengės karštligė gali padidinti mirties riziką, jei nebus tinkamai gydoma. Taigi ankstyva šios ligos diagnozė yra reikšminga jos savalaikiam gydymui.

Pažymėtina, kad nestruktūrinis baltymas 1 (NS1), labai konservuotas glikoproteinas, dažniausiai išsiskiria infekcijos metu Delspinigius virusas, kuris intensyviai laikomas pagrindiniu patogenezės veiksniu Dengės karštligė. Taigi NSI paprastai naudojamas kaip biologinis žymeklis ankstyvam šios ligos nustatymui.

Šiame tyrime buvo atliktas su daugiaaukščiu fermentu susijęs imunosorbento tyrimas(ELISA)kartu su tio nikotinamido adenino dinukleotidas (tio-NAD/S-NAD) Važiavimo dviračiu metodas (toliau – itin jautri ELISA) naudojamas NSI aptikti, po to atliekamas palyginimas su NAAT, siekiant patvirtinti jo aptikimo tikslumą.

2. Tradicinių aptikimo metodų privalumai ir trūkumai Dengės karštligė 

Šiuo metu tČia yra keturi pagrindiniai aptikimo metodai dėl Dengės karštligė.


Viruso išskyrimas ir identifikavimas pasižymi dideliu specifiškumu, tačiau užima daug laiko, trunka mažiausiai 5 dienas. Greitasis antigenų testas yra greičiausias ir ekonomiškiausias iš kitų metodų, tačiau jautrumas ir specifiškumas yra palyginti maži. Serologinį tyrimą, pagrįstą IgM ir IgG, riboja infekcijos dienų skaičius, nes Nutarė Tyrimas turi būti atidėtas, kol antikūnų lygis pakils iki aptinkamo lygio.

Klinikoje NAAT dažnai taikomas nustatyti Dengės karštligėnešvarumais dėl didelio jautrumo ir specifiškumo. Tačiau šis metodas yra brangus, sunkus ir linkęs į klaidingą pozityvumą, kurį turi atlikti apmokytas personalas. Siekiant įveikti šių metodų trūkumus, naujas aptikimo metodas ultrajautrus ELISA yra taikoma šiame tyrime.

3. Itin jautraus ELISA darbo eiga su tio-NAD ciklu

Antikūnų pora Yranaudojamas NS1 baltymo surinkimui sumuštinyje ELISA ir šarminėje fosfatazėje Yrapažymėtas ant antrinio antikūno. Be antikūnų, androsterono darinys, 3α-hidroksisteroiddehidrogenazė, tio-NAD ir NADH esinaudojamas tio-NAD fermentų ciklo sistemai konstruoti. Tio-NAD ciklo reakcijos metu tio-NADH nuolat kaupėsi trikampiu skaičiumi ir galėjo būti tiesiogiai matuojamas esant 405 nm absorbcijai.

4. Ultrajautrios ELISA ir NAAT palyginimas nustatant dengės NS1 baltymą

NAAT 60 egzempliorių yra teigiami dengės, o 25 - dengės neigiami. Dengės karštligės teigiamų mėginių NRAT ciklo slenksčio (CT) vertė svyravo nuo 12,42 iki 31,41. Atliekant itin jautrų ELISA tyrimą, 59 mėginiai yra atitinkamai teigiami NRA rezultatams, o 25 mėginiai yra visiškai neigiami NRA rezultatams.

Palyginti su NAAT, itin jautraus ELISA jautrumas ir specifiškumas yra atitinkamai 98,3 % ir 100 % (2 lentelė). Iš 60 NAAT patvirtintų dengės karštligės teigiamų pacientų mėginių tik 1 mėginys yra neigiamas ultrajautrioje ELISA. NAAT duomenys parodė, kad mėginys yra 4 tipo DENV infekcijos atvejis, kurio KT vertė yra 21,59. Itin jautraus ELISA tyrimo rezultatai beveik visiškai atitinka NAAT rezultatus, kai kappa vertė yra 0,972 (95 % PI: 0,917-1.0).

5. Išvada

Itin jautrus ELISA metodas yra lengvai atliekamas ir nereikalauja profesionalių stažuotojų. Aptikimą galima pradėti iškart po to, kai gaunamas nedidelis mėginys. Tai ypač tinka ankstyvam Dengės ligos nustatymui mažas pajamas gaunančiose šalyse.

Nuoroda

Chen, Po-Kai ir kt. "Pažangus dengės NS1 baltymo aptikimo metodas, naudojant itin jautrią ELISA su tio-NAD dviračiu". Virusai t. 15,9 1894. 2023 m. rugsėjo 8 d., doi:10.3390/v15091894

Produkto privalumai ir savybės BONTAC Thio-NAD/S-NAD

BONTAC yra one iš kelių įmonių, esančių Kinijakurie gali gaminti Thio-NADsu "Bonzyme"Viso fermentavimo metodas(draugiškas aplinkai;nėra kenksmingų tirpiklių likučių) ir unikali "Bonpure" septynių pakopų valymo technologija. BONTAC sujungia mokslinius tyrimus ir taikomąją veiklą, gamybą ir pardavimą, su savarankiškos gamyklos ir daugybė tarptautinių sertifikatų, užtikrinančių aukštą kokybę ir stabilų produktų tiekimą.

Atsakomybės apribojimas

BONTAC neatsako už jokias pretenzijas, tiesiogiai ar netiesiogiai kylančias dėl jūsų pasitikėjimo šioje svetainėje pateikta informacija ir medžiaga.