Išskirtiniai itin jautrios ELISA ir tio-NAD ciklo privalumai nustatant dengės NS1 baltymą
1. Įvadas
Dengės karštligė yra ūminė infekcinė liga, kurią sukeliaDengės virusas per užkrėsto Aedes rūšies (Ae. aegypti arba Ae. albopictus) uodų įkandimą,pagrindiniai simptomai, tokie kaip aukšta temperatūra, galvos svaigimas, galvos skausmas, bėrimas irStiprus Skausmai (akių, raumenų, sąnarių ar kaulų skausmas) ir pan. Ši liga plačiai paplitusi tropiniuose ir subtropiniuose klimatuose. Manoma, kad kasmet užsikrečia nuo 100 iki 400 milijonų žmonių, iš kurių daugiau nei 80 % dažniausiai būna lengvi ir be simptomų. Vis dėlto sunki dengės karštinė gali padidinti mirties riziką, jei nėra tinkamai gydoma. Todėl ankstyva šios ligos diagnostika yra svarbi jos laiku gydymui.Svarbu paminėti, kad nestruktūrinis baltymas 1 (NS1), labai konservuotas glikoproteinas, daugiausia išskiriamas infekcijos metuDengėVirusas, kuris intensyviai laikomas pagrindiniu patogenezės veiksniuDengės karštligė. Todėl NSI dažniausiai naudojamas kaip biomarkeris ankstyvai šios ligos diagnostikai.
Šiame tyrime buvo atliktas sumuštinių fermentų susietas imunosorbento testas (ELISA) kartu suthio nikotinamido adenino dinukleotidas (thio-nad/s-nad)Dviračių metodas (toliau vadinama itin jautria ELISA) naudojamas NSI aptikimui, po to atliekamas palyginimas su NAAT, siekiant patvirtinti jo aptikimo tikslumą.
2. Tradicinių aptikimo metodų privalumai ir trūkumaiDengės karštligė
Šiuo metu tŠtai keturi pagrindiniai aptikimo metodaidėl Dengės karštinė.
Viruso izoliacija ir identifikavimas pasižymi dideliu specifiškumu, tačiau užima daug laiko ir užtrunka bent 5 dienas. The Greitas antigenas Testas yra greičiausias ir ekonomiškiausias iš kitų metodų, tačiau jautrumas o specifiškumas yra gana mažas. Serologinis testas, pagrįstas IgM ir IgG, yra ribojamas Užsikrėtimo dienų skaičių, kaipTheTestas turi būti atidėtas iki antikūnų lygio pakyla iki aptinkamo lygio.
Klinikoje NAAT dažnai taikomas nustatytiDengės karštligė dėl jo didelio jautrumo ir specifiškumo. Tačiau šis metodas yra brangus, varginantis ir linkęs į klaidingą pozityvumą, kurį turi taikyti apmokyti specialistai.Norint įveikti šių metodų trūkumus, atsirado naujas aptikimo metodasitin jautri ELISA yra taikyta šiame tyrime.
3. Itin jautrios ELISA darbo eiga su thio-NAD ciklais
Porą antikūnųyra naudojama NS1 baltymo sugėrimui sumuštinyje ELISA ir šarminei fosfatazeiyra pažymėta ant antrinio antikūno. Be antikūnų, yra androsterono darinys – 3α-hidroksisteroidų dehidrogenazė, tio-NAD ir NADHyra naudojama tio-NAD fermentų ciklo sistemai sukurti. Tio-NAD ciklinės reakcijos metu tio-NADH nuolat kaupėsi trikampiu skaičiumi ir galėjo būti tiesiogiai išmatuotas esant 405 nm absorbcijai.
4. Ultrajautrios ELISA ir NAAT palyginimas nustatant Dengės NS1 baltymą
NAAT atveju 60 mėginių yra dengės teigiamos, o 25 – dengės neigiamos. Tų dengės teigiamų mėginių NAAT ciklinio slenksčio (KT) vertė svyravo nuo 12,42 iki 31,41.Ultrajautrioje ELISA teste 59 mėginiai yra atitinkamai teigiami NAAT rezultatams, o 25 mėginiai yra visiškai neigiami NAAT rezultatams.Palyginti su NAAT, itin jautrios ELISA jautrumas ir specifiškumas yra atitinkamai 98,3 % ir 100 % (2 lentelė). Iš 60 NAAT patvirtintų dengės dengės teigiamų pacientų mėginių tik 1 mėginys yra neigiamas itin jautrioje ELISA grupėje. NAAT duomenys parodė, kad mėginys yra 4 tipo DENV infekcijos atvejis, kurio KT vertė yra 21,59. Ultrajautrios ELISA rezultatai beveik visiškai sutampa su NAAT rezultatais, o kappa vertė yra 0,972 (95% PI: 0,917-1.0).
5. Išvada
Ultrasensitive ELISA metodas yra lengvai atliekamas ir nereikalauja profesionalių mokinių. THE aptikimas gali būti pradėtas iškart gavus nedidelį mėginį. Jis ypač tinkamas ankstyvam aptikimuiDengėligos Mažas pajamas gaunančios šalys.Nuoroda
Chen, Po-Kai ir kt. "Pažangus dengės NS1 baltymo aptikimo metodas, naudojant itin jautrią ELISA su Thio-NAD ciklu." Virusai, t. 15, 9, 1894 m. 2023 m. rugsėjo 8 d., doi:10.3390/v15091894Produkto privalumai ir savybėsBONTAC Thio-NAD/S-NAD
BONTAC yra oviena iš nedaugelio įmoniųKinija kuris gali pagaminti Thio-NAD, su"Bonzyme" Viso fermento metodas (Draugiška aplinkai; Nėra kenksmingų tirpiklio likučių) ir unikalią "Bonpure" septynių žingsnių valymo technologiją. BONTAC integruoja MTEP, gamybą ir pardavimą, su savarankiškai valdomos gamyklos ir keletas tarptautinių sertifikatų, užtikrinančių aukštą produktų kokybę ir stabilų tiekimą.
