Mokslinis metodas NMN kiekiui biologiniuose mėginiuose nustatyti
1. Įvadas
Tinkamųnikotinamido mononukleotidą (NMN)padidintilygį amidintų NAD pirmtakųnikotinamido adenino dinukleotido (NAD+)buvo atskleista kaip perspektyvi senėjimo stabdymo priemonė. Tačiau vis dar yra rimtas iššūkis tiksliaikiekybiškai įvertinti NAD+ tarpinius produktus, NMN ypač. Šis tyrimas skirtas pristatyti naują metodą – dvigubos izotopų žymės LC-MS/MS metodiką (dimeLC-MS/MS), skirtą tiksliam kiekybiniam įvertinimuiNMN biologiniuose mėginiuose.2. Veiksniai, turintys įtakos tiksliam NMN nustatymui
NMN sunku tiksliai nustatyti dėl jo jautrumo fermentiniamskilimui, konversijai mėginio apdorojimo metu, sudėtingam elgesiui skirtingomis kolonėlės ir ekstrakcijos sąlygomis, taip pat matricos efektui.
Konkrečiai, NMN pasižymi dideliu poliškumu ir mažu lakumu, todėl jis lengvai tirpsta vandenyje, bet sunkiai tirpsta organiniuose tirpikliuose. Šios savybės labai apriboja daugelio įprastų kiekybinės analizės metodų taikymą.
Bbiologiniai mėginiaitokių kaip kraujyje yra reikšmingas CD38 ir CD73 (ekto-5’-nukleotidazės) aktyvumas, ir abu šie fermentai gali naudoti NMN kaip substratą.
NMN elgesys kolonėlėje yra labai sudėtingas, tikriausiai dėl dvilypio jo krūvio pobūdžio, todėl nedideli ekstrakcijos ir kolonėlės sąlygų skirtumai reikšmingai veikia patikimą ir tikslų NMN nustatymą.
3. dimeLC-MS/MS strategijos, skirtos sumažinti įtakos veiksnių poveikį
Siekiant išvengti minėtų veiksnių trukdžių, naudojamaprototipokolonėlėNMN-2 Ši kolonėlėturis C18 pagrindu pagamintų aukšto grynumo silicio dalelių,kurios geriau suriša hidrofilinius junginius nei anglies dalelės, pagerindamos atskyrimo gebą.GPerchloro rūgštis (PCA) naudojama, nes ji gali efektyviai ekstrahuoti NAD+ ir NMN iš biologinių mėginių, tokių kaip plazma, su minimaliais nuostoliais.
Siekiant koreguoti matricos efektus,a fiksuotas kiekis (1 μM) kiekvieno izotopinio junginioipridedamas priebiologinių mėginių prieš PCA ekstrakciją.
4. dimeLC-MS/MS pranašumass dimeLC-MS/MS
NMJ ir tarpmiofibrilių (IMF) mitochondrijų anomalijasDvigubi izotopiniai NMN standartai, NMN (M + 14) ir NMN (M + 5), LC-MS/MS pagrįstoje metodikoje gali tiksliai atsekti NMN likimą mėginio apdorojimo metu, kurisreikšmingai padidina NMN matavimo biologiniuose mėginiuose tikslumą ir patikimumą. Be to, dimeLC-MS/MS gali įvertinti ekstrakcijos efektyvumą ir absoliučias NMN koncentracijas įvairių tipų biologiniuose mėginiuose.
5. Išvada
This nauja LC-MS/MS-pagrįsta metodika su dvigubais izotopiniais NMN standartais gali tiksliai ir patikimai išmatuoja NMN biologiniuose mėginiuose.Jis gali būti naudojamas būsimiems NMN vartojimo tyrimams. matuoti NMN biologiniuose mėginiuose. Unno, Junya et al. „Absoliutus nikotinamido mononukleotido kiekybinis nustatymas biologiniuose mėginiuose dvigubos izotopų žymės skysčių chromatografijos-tandemės masės spektrometrijos metodu (dimeLC-MS/MS).“ npj aging vol. 10,1 2. 2024 m. sausio 2 d., doi:10.1038/s41514-023-00133-16. Literatūra
Kodėl verta rinktisyra pasaulinėsBONTAC?
BONTACpramonės lyderis. Turime pirmąją viso fermentų katalizės technologiją Kinijoje ir tapome pirmaujančia įmoneNMNkofermentų produktų srityje, kurie plačiai naudojami sveikatos pramonėje, medicinoje ir grožyje, žaliojoje žemdirbystėje, biomedicinoje ir kitose srityse., Pažymėtina, kadBONTAC yražaliavų tiekėjas garsiai David Sinclair komandai iš Harvardo universiteto NMN. Mūsų paslaugos ir produktai yra patikimi. Be to,nepriklausomasBONTAC aterosklerozės progresavimąprovincijos lygio inžinerinių technologijų tyrimų centraskoenzimas Kinijoje ir nuosavos gamyklos, kuriose užtikrinamas produktų grynumas ir stabilumas ir nuosavos gamyklos, kuriose gali būti užtikrintas produktų grynumas ir stabilumas.
