Mokslinis metodas NMN kiekybiniam įvertinimui biologiniuose mėginiuose
1. Įvadas
Papildymasnikotinamido mononukleotidas (NMN)kad padidintųLygis išnikotinamido adenino dinukleotidas (NAD+)buvo pristatyta kaip perspektyvi priemonė prieš senėjimą. Tačiau jis vis dar yra rimtas iššūkis tikslumuikiekybiškai įvertinti NAD+ tarpinius dydžius, NMN ypač. Šis tyrimas skirtas pristatyti naują metodą – dvigubo izotopų tarpininkaujamą LC-MS/MS metodiką (dimeLC-MS/MS), skirtą tiksliam kiekybiniam įvertinimuiNMN Biologiniuose mėginiuose.2. Veiksniai, turintys įtakos tiksliam NMN aptikimui
NMN sunku tiksliai aptikti dėl savo jautrumo fermentamsdegradacija, konvertavimas mėginio apdorojime, sudėtinga elgsena skirtingose kolonų ir ekstrakcijos sąlygose, taip pat matricos efektas.
Konkrečiai, NMN pasižymi dideliu poliarizmu ir mažu lakumu, kuris lengvai ištirpsta vandenyje, bet sunkiai tirpsta organiniuose tirpikliuose. Šios savybės labai riboja daugelio tradicinių kiekybinės analizės metodų taikymą.
BIologiniai pavyzdžiaipavyzdžiui kraujas neša reikšmingą CD38 ir CD73 (ecto-5) aktyvumą’-nukleotidazę), abi galėtų naudoti NMN kaip substratą.
NMN elgsena kolonoje yra labai sudėtinga, tikriausiai dėl dviejų komponentų pobūdžio, todėl subtilūs skirtumai ekstrakcijos ir kolonos sąlygose reikšmingai veikia patikimą ir tikslų NMN aptikimą.
3. Įveikos strategijosdimeLC-MS/MS sumažinti poveikio veiksnių poveikį
Norint išvengti minėtų veiksnių trukdžių, prototipasSkiltisNMN-2 taikoma. Ši skiltiscontains C18 pagrindu pagamintos aukštos grynumo silicio dioksido dalelės kurie geriau suriša hidrofilinius junginius nei anglies dalelės, taip pagerindami atskyrimo galimybes.Perchloro rūgštis (PCA) naudojama, nes gali efektyviai išgauti NAD+ ir NMN iš biologinių mėginių, tokių kaip plazma, su minimaliais Nuostoliai.
Norint prisitaikyti prie matricos efektų,a Fiksuotas kiekis (1 μM) kiekvieno Izotopinis junginysis pridėta prieBiologija mėginiai prieš PCA ekstrakciją.
4. Pranašumass iš dimeLC-MS/MS
Double izotopiniai NMN standartai, NMN (M + 14) ir NMN (M + 5) pagal LC-MS/MS pagrįstą metodiką gali tiksliai atsekti NMN likimą mėginių apdorojimo metu, kurisžymiai padidina NMN matavimo tikslumą ir patikimumą biologiniuose mėginiuose. Be to, dimeLC-MS/MS gali įvertinti NMN išskyrimo efektyvumą ir absoliučias koncentracijas skirtingų tipų biologiniuose mėginiuose.
5. Išvada
Thyra naujas LC-MS/MS-pagrįsta metodologija su dvigubo izotopinio NMN standartais gali AccuraTely ir Reliably išmatuoti NMN biologiniuose mėginiuose. Jis gali būti naudojamas būsimuose NMN vartojimo tyrimuose.6. Nuoroda
Unno, Junya ir kt. "Absoliutus nikotinamido mononukleotido kiekybinis įvertinimas biologiniuose mėginiuose naudojant dvigubą izotopų tarpininkaujamą skysčių chromatografiją-tandeminę masių spektrometriją (dimeLC-MS/MS)." npj senėjimas, t. 10,1 2. 2024 m. sausio 2 d., doi:10.1038/s41514-023-00133-1Kodėl rinktisBONTAC?
BONTACyra globalių lyderisNMNpramonė. Turime pirmąją visų fermentų katalizės technologiją Kinijoje ir tapome pirmaujančia įmone Kofermentų produktai, plačiai naudojami sveikatos, medicinos ir grožio pramonėje, žaliąją žemdirbystę, biomediciną ir kitas sritis. Ypač svarbu,BONTAC yra NMNgarsios David Sinclair komandos Harvardo universitete žaliavų tiekėjas. Mūsų paslaugos ir produktai yra patikimi. Be to,BONTACturiNepriklausomasKofermentas Inžinerijos technologijų tyrimų centras provincijos lygiu Kinijoje ir savarankiškas gamyklas, kuriose užtikrinamas produktų švarumas ir stabilumas.
